产品简介：

Fura-2 AM是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一，是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM 的荧光比较弱，最大激发波长为 369 nm，最大发射波长为 478 nm，并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM 进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成 Fura-2，从而被滞留在细胞内。Fura-2 和钙离子结合后，最大激发波长为 335 nm (最大激发波长随离子浓度的不同而有所不同)，最大发射波长为 505 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 340 nm，发射波长为 510 nm。如果做双波长检测，则推荐使用的激发波长为 340 nm 和 380 nm。

本产品是配制于无水DMSO中的储存液，浓度为2mM。

使用方法（仅供参考）：

1．Fura-2 AM工作液的配制：用HBSS稀释Fura-2 AM溶液，制备1-5µM的Fura-2 AM工作液。

注：工作液现配现用；具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。为了避免过度加载造成细胞毒性，建议在取得有效结果的基

础上尽量使用最低探针浓度。

2．对于待检测的培养细胞，除去培养基，使用HBSS缓冲液洗涤细胞3次。

3．将Fura-2 AM工作液加入细胞，加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养15-60 min，然后除去Fura-2 AM工作液。

注：如果是首次实验不能确定孵育条件，建议先尝试 37℃孵育30分钟，观察荧光效果。如果细胞死亡较多，则适当缩短时间；

如果荧光强度太弱，则适当延长时间。

4．用HBSS缓冲液洗涤细胞3次，以充分去除残留的Fura-2 AM工作液。

5．加入HBSS缓冲液覆盖细胞，37℃孵育约20-30 min，以确保AM体在细胞内的完全去酯化作用。

6．检测：激发波长 380 nm（游离钙）和 340 nm（结合钙），发射波长 510nm。

注意事项：

1、本产品在4ºC、冰浴等较低温度下可能会凝固而粘在管底、管壁或管盖，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。

2、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃避光保存，6个月有效，避免反复冻融。