10×Western转膜液
商品详情：
产品简介：
10×Western转膜液可以用于Western时湿法电转膜，使用前需配制成1×Western转膜液。本转膜液不含甲醇和SDS，无需调节pH值。
使用方法（仅供参考）：
一、1×Western转膜液配制方法：
量取100 ml 10×Western转膜液，然后按照下表配制 1×Western转膜液：
目的蛋白 | 添加量 | ||
无水甲醇 | SDS | ||
变性蛋白 | ＜20 kD蛋白 | 20% | 0.01% |
20-80 kD蛋白 | 10% | 0.05% | |
＞80 kD蛋白 | 10%（NC膜） | 0.10% | |
0-5%（PVDF膜） | |||
非变性蛋白 | ＜20 kD蛋白 | 5-10% | 0.01% |
20-80 kD蛋白 | 0-5% | 0.05% | |
＞80 kD蛋白 | 0% | 0.10% | |
加入超纯水，定容至1 L，无需调节pH，pH~8.3 | |||
注：甲醇和SDS在转膜中有拮抗作用。甲醇使蛋白更加结合在膜上，而SDS让蛋白更加离开膜。因此对大蛋白转膜来说，多加SDS，少加甲醇；而对小蛋白转膜，多加甲醇，少加SDS。
二、转膜：
1、膜的选择：转膜可以选择PVDF膜或NC膜。根据蛋白大小选择膜的孔径。一般说来，大于20 kD蛋白选择0.45 μm孔径，低于20 kD选择0.22 μm孔径。PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿活化。
2、三明治结构：制作三明治时，将膜置于转膜夹芯正极一侧，凝胶置于转膜夹芯负极一侧，这样凝胶上带负电荷的蛋白才能转移到膜上。蛋白转膜三明治结构如下：
负极（电转夹黑色面）-海绵垫-滤纸-凝胶-膜-滤纸-海绵垫-正极（电转夹白色面）
3、转膜条件：
以下转膜条件仅供参考，请根据目的蛋白确定最佳的转膜条件。
膜孔径 | 蛋白大小 | 稳流 | 建议时间 | 降温措施 |
0.22 μm | 低于20 kD | 200 mA | ~30分钟 | 不需要 |
0.45 μm | 20-50 kD | 300 mA | ~45分钟 | 需要 |
0.45 μm | 50-200 kD | 350 mA | ~50分钟 | 需要 |
0.45 μm | 高于200 kD | 350 mA | ~2.5-4.5小时 | 需要 |
注意事项：
1、转膜液如果颜色变成浅棕色或黄褐色，应丢弃。
2、1×Western转膜液建议现用现配，不建议保存。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件：
常温保存，有效期两年。
| 货号 | BL1312A |
| 规格 | 500ml |
| 品牌 | Biosharp |
